大腸桿菌多價工程疫苗對孕母豬免疫效力高

介紹了大腸桿菌耐熱腸毒素b(stb)的編碼基因、理化性質、免疫學特征、分泌特征、毒性相關氨基酸殘基、空間結構、膜受體以及stb致動物腹瀉的機理。認為stb是一種十分重要的腸毒素,應進一步加強對stb及其致腹瀉機理的研究。

輔酶q10(coq10)是一種脂溶性抗氧化劑,具有提高人體免疫力、延緩衰老和增強人體活力等功能,廣泛應用于制藥行業和化妝品行業。微生物發酵法能可持續性生產輔酶q10,具有越來越多的商業價值。本研究首先將來自類球紅細菌的十聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(dps)整合到大腸桿菌atcc8739染色體上,敲除內源的八聚異戊二烯焦磷酸合成酶基因(ispb),使內源的輔酶q8合成途徑被輔酶q10合成途徑取代,得到穩定生產輔酶q10的菌株gd-14,其輔酶q10產量達0.68mg/l,單位細胞含量達0.54mg/gdcw。隨后用多個固定強度調控元件在染色體上對mep途徑的關鍵基因dxs和idi基因以及ubica基因進行組合調控,將輔酶q10單位細胞含量提高2.46倍(從0.54到1.87mg/g)。進一步引入運動發酵單胞菌zymomonasmobilis的glf轉運蛋白代替自身的磷酸烯醇式丙酮酸:碳水化合物磷酸轉移酶系統(pts),使輔酶q10產量進一步提高16%。最后,對高產菌株gd-51進行分批補料發酵,輔酶q10產量達433mg/l,單位細胞含量達11.7mg/gdcw。這是目前為止文獻報道的大腸桿菌產輔酶q10最高菌株。

乙醇酸（glycolate）是一種在工業上有多種用途的重要化合物。本研究首先在大腸桿菌mg1655（de3）中敲除了ldha（乳酸脫氫酶）,獲得菌株mgly1,作為出發菌株。然后通過調節乙醇酸合成途徑的關鍵酶——異檸檬酸裂解酶（acea）、乙醛酸還原酶（ycdw）、異檸檬酸脫氫酶激酶/磷酸化酶（acek）的表達水平,得到乙醇酸產率為0.24g/g葡萄糖（占理論產率的28.2%）。過量表達檸檬酸合成酶（glta）,乙醇酸產率提高到0.326g/g葡萄糖（占理論產率的38.3%）。然后在mgly1中敲除了glcb和aceb（蘋果酸合成酶）,減少了乙醇酸合成的前體乙醛酸的消耗。最終獲得的工程菌株mgly335乙醇酸產率達到0.522g/g葡萄糖（占理論產率的61.4%）。

遼寧省益康生物制品廠與解放軍軍需大學合作聯合研制成功“仔豬大腸桿菌st_1—lt_b雙價基因工程菌苗”。該苗是利用基因工程技術將大腸桿菌腸毒素st_1—lt_b分別克隆、測序后融合到一起插入質粒載體

近幾年來，中赤鄉乃至武平縣各鄉鎮農戶中仔豬黃痢病的發病率、死亡率均較高，尤其是農村中母豬舍簡陋、衛生條件差的，黃痢病的發病率常達50％，死亡率高達30％。為尋求防治黃痢病的有效措施和辦法，我站從1997年10月份起至1998年2月，應用哈獸研所生產的“豬大腸桿菌k8...

產腸毒素性大腸桿菌(etec)引起新生幼畜(仔豬、犢牛、羔羊等)腹瀉在國內外都很普遍,是導致幼畜死亡的主要原因之一。etec具有兩類致病因子:一種為腸毒素,即不耐熱性腸毒素(lt)和耐熱性腸毒素(st)。另一種為粘著素(定居因子),已知的粘著素抗原有k88、k99、987p、f41和f42等。etec借助這些粘著素定居于腸道粘膜的上皮細胞上,在那里大量繁殖,并產生大量腸毒素,導致幼畜發病。據國內統計資料表明,幼畜大腸桿菌性腹瀉在腹瀉中的比例,豬為35％,牛為26％,羊為17％,其死亡率在10～30％左右,流行面廣,死亡率高,即便幸免于死的幼畜亦常生長滯緩,難以育肥,造成很大經濟損失,對家畜飼養業危害甚大。加上近幾年抗藥菌株大量增加,致使治

通過在au納米顆粒表面修飾辣根過氧化酶(hrp)標記的大腸桿菌抗體制備了一種新型的au納米標記物,并將該納米標記物應用于增強電化學免疫分析大腸桿菌.經過酶聯免疫反應后,au納米標記物、免疫磁性顆粒(imb)和大腸桿菌形成了imb/抗體-大腸桿菌-au納米標記物的三明治式免疫復合物.以3,3',5,5'-四甲基聯苯二胺(tmb)溶液作為底物,采用電化學與流動注射檢測(fia)相結合的技術測定hrp的活性.檢測到的電流大小與免疫復合物上hrp的量成正比,從而與大腸桿菌的濃度成正比.au納米顆粒增加了hrp的負載量,增強了電化學信號,大大提高了大腸桿菌的檢測靈敏度.實驗結果表明,大腸桿菌濃度在1.0×102～5.0×104cfu·ml-1范圍內與電流大小成線性相關,最低檢測限達50cfu·ml-1,若對大腸桿菌樣品溶液進行預濃縮,將得到更寬的檢測范圍和更低的檢測限.本方法總的分析時間比其他方法短,在1h內就能完成對大腸桿菌樣品的快速檢測.

羔羊是嚴重危害畜牧業生產的一種高發病。根據對新疆兵團十三個師（局）1995年的疫情調查統計，全兵團羔羊發病16．64萬只，發病率14．80％；死亡9．11萬只，死亡率8．10％，該病目前是危害養羊生產的重點疫病。為了探討基因工程苗防治該病的可行性，我們進行了羔羊大腸桿...

采用由遼寧省益康生物制品廠提供的仔豬大腸桿菌基因工程st1—ltb雙價滅活疫苗對臨產前30天、體重相近的妊娠母豬143頭進行了應用效果觀察。結果表明,在臨產前25天和15天分別頸部肌肉注射該

通過在大腸桿菌(escherichiacoli)中過量表達來自加州月桂(umbellulanacalifornia)的硫酯酶基因bte,極大地加強了大腸桿菌中碳脂肪酸(mcfas)的生產。并對mcfas在大腸桿菌胞內外的分布,以及是否對大腸桿菌細胞膜磷脂組成產生影響等進行了系統的分析。結果發現,產生的mcfas絕大部分存在于大腸桿菌細胞內,且未對其細胞膜磷脂組成產生明顯影響。為了繼續提高mcfas的產量,又進一步對大腸桿菌進行了代謝工程改造,通過結合表達乙酰-coa羧化酶(accase),優化硫酯酶的表達水平等,最終獲得了188.9mg/l的總mcfas產量,并且產生的mcfas的比例高達85%以上,實現了mcfas的高特異性生產。

中國農科院哈爾濱獸醫研究所陳章水研究員等,應用基因工程技術研制成大腸桿菌k_(88)k_(99)雙價基因工程苗。用該苗后海穴接種7頭妊娠母豬,分娩后用強毒攻擊53頭仔豬,保護率為90.6％(48/53);皮下接種5頭妊娠母豬,分娩后用強毒攻擊47頭仔豬,保護率為72.3％(34/47);從而證

對妊娠14~16周母豬頸部肌肉注射仔豬大腸桿菌k88-st1-ltb三價基因工程滅活疫苗(以下簡稱三價滅活苗)的結果表明:三價滅活苗可以大大降低仔豬大腸桿菌的發病率和死亡率,差異極顯著(p<0.01);對仔豬生長安全、無副作用;三價滅活苗的使用效果明顯優于仔豬大腸桿菌k88-k99雙價基因工程滅活疫苗(以下簡稱雙價滅活苗);疫苗現場應用免疫保護率明顯高于雙價滅活苗,差異極顯著(p<0.01)。

仔豬大腸桿菌K88ac-ST_1-LT_B三價基因工程滅活苗 Ⅳ.保存期試驗和田間試驗

仔豬大腸桿菌K88_(ac)-ST_1-LT_B三價基因工程滅活苗 Ⅲ.實驗室生產與檢驗

蘇云金芽胞桿菌菌粉、玉米淀粉與線性低密度聚乙烯共混制得淀粉塑料,通過地埋降解和搖床快速降解試驗研究了淀粉塑料中淀粉的降解率。結果發現地埋降解120d后含5%菌粉和50%淀粉的薄膜淀粉降解率達到89.52%,掃描電鏡觀察大部分淀粉顆粒破碎,出現許多小孔。不加菌粉的淀粉降解率只35.48%,表明添加的菌粉對淀粉降解有明顯的促進作用

不同濃度bt粉劑藥液防治春尺蠖不同齡期幼蟲試驗結果表明:200倍液濃度10d后防效達到了100%,是防治春尺蠖幼蟲最理想的濃度。300倍液濃度防效更正減退率達到97%,根據各地地理條件、氣候條件、蟲口密度等,也可采用300倍液濃度進行防治。

據報道，日本科學技術振興機構等研究人員利用大腸桿菌，通過轉基因操作和光反應等方法，制造出400℃左右高溫下也不會變形的生物塑料。而此前生物塑料的最高耐熱溫度是305℃。

日本研究人員日前宣布,他們利用大腸桿菌,通過轉基因操作和光反應等方法,制作出400攝氏度左右高溫下也不會變性的生物塑料,是當前同類塑料中最耐熱的。日本科學技術振興機構等機構聯合發表的公報說,這種塑料是透明的,硬度特別高,用于汽車上代替玻璃,能大幅度減輕汽車重量,從而節約能源、減少二氧化碳排放。

日本研究人員日前宣布,他們利用大腸桿菌,通過轉基因操作和光反應等方法,制作出400攝氏度左右高溫下也不會變性的生物塑料,是當前同類塑料中最耐熱的。日本科學技術振興機構等機構聯合發表的公報說,這種塑料是透明的,硬度特別高,用于汽車上代替玻璃,能大幅度減輕汽車重量,從而節約能源、減少二氧化碳排放。生物塑料用來自植物等的生物質為原材料生產,有利于保護環境。但此前的生物塑料硬度和耐熱性都較差,所以用途有限,一般都是作為一次性材料使用。日本研究人員注意到,某些放線菌分泌的一種氨基

用大腸桿菌k99、f41基因工程菌毛苗對1500頭懷孕母牛皮下注射菌毛苗5mg/頭,局部和全身均無任何不良反應,未造成母牛流產、早產及犢牛畸形,無任何毒副作用。對菌毛苗主動免疫的懷孕母牛所產犢牛吃初乳后用強毒k99、f41大腸桿菌攻擊,保護率達90%,證明該菌毛苗具有較強的k99和f41免疫原性,可使犢牛獲得確實的被動免疫。在5個牛場對1480頭犢牛進行菌毛苗免疫效果觀察,未免疫對照組腹瀉發病率為

將檢測抗體(dab)和二茂鐵甲酸(fca)固載于二氧化硅修飾的氧化鋅(zno@sio2)表面制備納米復合材料標記物({dab-zno-fca}),并將其用于放大電化學免疫分析乳制品中大腸桿菌(escherichiacoli)。采用"三明治"免疫分析模式,基于二茂鐵甲酸產生的電流信號與大腸桿菌濃度之間的關系實現了對大腸桿菌的檢測。結果表明,二茂鐵甲酸產生的電流信號與大腸桿菌濃度的對數在2.0×102~2.0×106cfu/ml范圍內保持良好的線性關系,檢出限為100cfu/ml(s/n=3)。利用該電化學免疫分析方法對乳制品進行了大腸桿菌的加標回收試驗,回收率在95.8%~105%之間。