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目的:建立同時測定野菊花中綠原酸、木犀草苷和蒙花苷3個主要活性成分含量的方法。方法:采用RP-HPLC法,選用Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm,)色譜柱;以乙腈-0.05%磷酸溶液為流動相(梯度洗脫);流速為1.0mL.min-1;檢測波長為334nm;柱溫為30℃。結(jié)果:綠原酸、木犀苷和蒙花苷分別在40.44～647.04ng(r=0.9998)、19.50～311.92ng(r=0.9997)和253.62～4057.82ng(r=0.9999)范圍內(nèi)線性關(guān)系良好;平均回收率分別為100.96%、99.99%和98.94%,RSD均<2.0%。22批野菊花藥材中綠原酸含量為0.108%～0.545%,木犀苷含量為0.029%～0.393%,蒙花苷含量為0.028%～3.518%。結(jié)論:本方法簡便準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠,可以用于野菊花藥材的含量測定。
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本文建立了適合中國菊花種質(zhì)資源長期保存的玻璃化超低溫保存技術(shù)體系。在4℃下,把1~2mm的菊花莖尖放在含0.4mol/L蔗糖的MS培養(yǎng)基上暗培養(yǎng)2~3d,用預(yù)處理液在25℃下處理30min,再用玻璃化試劑PVS2在冰浴條件下處理15min,換新鮮的PVS2試劑并迅速投入液氮。液氮保存24h后,40℃水浴解凍2min,用含蔗糖1.2mol/L的MS液體培養(yǎng)基洗滌20min,濾紙吸干后接種到恢復(fù)培養(yǎng)基中,在25℃條件下弱光培養(yǎng)1~3d轉(zhuǎn)入正常光照培養(yǎng)條件下培養(yǎng),2周后成活率可達(dá)86%以上,成活的莖尖均可再生。
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