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以N-糖基化提高畢赤酵母重組表達β-葡萄糖醛酸苷酶（PGUS-P）的熱穩定性為目的,在PGUS-P模擬結構分析的基礎上,半理性方法設計并通過定點突變引入具有EAS（enhanced aromatic sequence）序列特征的新N-糖基化位點,經畢赤酵母重組表達后,獲得了3個新糖基化的突變酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259。反應動力學分析表明,與原始PGUS-P相比,突變酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259催化甘草酸水解的Km變小,Kcat/Km增加,表明其對底物甘草酸的親和力和催化效率均得到提高。熱穩定性分析表明,PGUS-P-35和PGUS-P-259的熱穩定性得到改善,在65℃下保溫90 min,其熱穩定性相對PGUS-P分別提高了13%和11%。研究表明在蛋白質的合適位點引入糖基修飾對提高蛋白的熱穩定性具有促進作用。
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目的:研究珍珠梅水提取物對D-半乳糖所致大鼠急性肝損傷的防護作用。方法:50只大鼠隨機分為正常組、模型組、大和小劑量給藥組、陽性對照組5個組。給藥組按10g/kg、5g/kg劑量以珍珠梅水提取物灌胃;陽性對照組按0.2g/kg劑量以聯苯雙酯灌胃;正常組、模型組以等體積生理鹽水灌胃;共5天。第4天,模型組和給藥組按0.5g/kg劑量腹腔注射D-半乳糖,正常組腹腔注射等體積生理鹽水。腹腔注射D-半乳糖24小時后,摘眼球取血,用比色分析法測定大鼠血清AST、ALT的活性,血清和線粒體超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione perioxidase,GSH-PX)的活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。結果:珍珠梅水提物顯著降低因D-半乳糖所引起的大鼠血清ALT、AST的升高;對血清SOD、GSH-PX活性有明顯的升高作用;對MDA含量有降低作用。結論:珍珠梅水提物對D-半乳糖所致大鼠急性肝損傷有防護作用。
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