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構建了用于微流控細胞分析芯片的發光二極管(LED)誘導透射式熒光檢測微系統,以克服現有熒光檢測系統體積大、能耗高,以及激發光光路、檢測區域和熒光收集光路間光學耦合效率低等問題。該系統的激發光光路和熒光收集光路互成135°,LED發出的激發光經透鏡聚焦和激發光濾色片濾光后,經直徑為200μm的小孔光闌限束,然后投射到微流控芯片通道末端的檢測區域;產生的熒光及雜散光經加工后置于微流控芯片底部的發射光高通干涉濾色薄膜后,被光電倍增管收集。以HepG2肝癌細胞為測試樣本對該熒光檢測微系統的有效性進行了評測,結果顯示:當LED工作電流為200mA,PMT控制電壓為3.5V時,可產生與背景噪聲明顯區分的峰值信號;用250s觀測時間得到了8個平均峰高為0.7V的峰值信號,與熒光顯微鏡觀察結果一致,實現了細胞的在線計數檢測功能。提出的系統為新型微全細胞分析提供了一種新的技術途徑。
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有別于傳統的微流控芯片壓塑成型方法,本文提出注塑成型加工塑料微流控芯片的新工藝.采用UV-LIGA技術制作成型微通道的型芯,設計制造了微流控芯片注塑模具.充模試驗表明,如何使微通道復制完全是微流控芯片注塑成型的主要技術難點.模擬與理論分析表明,熔體在微通道處出現滯流現象是復制不完全的主要原因;搭建了可視化裝置對此加以試驗驗證.利用正交試驗方法進行充模試驗,研究各工藝參數對微通道復制度的影響.試驗表明模具溫度對提高微通道復制度起決定性作用;注射速度和熔體溫度是次要因素,而注射壓力相對其他因素影響力較差,但必須保持在一個較高的水平.依此形成塑料微流控芯片的注塑成型工藝,對于寬80μm、深50μm截面的微通道而言,可使微通道復制度由70%提高到90%,滿足使用要求.
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